摘要：立足資源保護(hù)及實驗動物化，利用我國特有的小型豬資源，通過選育建立實驗用 指山小型豬 封閉群和近交系，培育符合生物醫(yī)學(xué)需要、標(biāo)準(zhǔn)化程度高的實驗用五指山小型豬。
方法
2．1 封閉群選育
2．1．1 組建核心群和生產(chǎn)群核心群根據(jù)引種群種豬的來源和血統(tǒng)嚴(yán)格挑選， 由l4頭公豬和30頭母
豬組成。主要用于保種選育和為生產(chǎn)群提供種豬。生產(chǎn)群由引進(jìn)的其它種豬以及核心群生產(chǎn)的種
豬組成。生產(chǎn)普通級實驗動物，用于生產(chǎn)性能測定、獸醫(yī)生物制品檢定和生物醫(yī)藥實驗等。
2．1．2 實行閉鎖繁育豬群嚴(yán)格閉鎖，不再引進(jìn)任何外來種豬，后備豬均來自封閉群后代。為控制每代近交系數(shù)上升速度，采用避免全同胞交配的不完全隨機(jī)交配。
2．1．3 選種方法盡量保持每個世代的個體處于相同的飼養(yǎng)管理條件下，然后根據(jù)自身成績結(jié)合同胞資料進(jìn)行嚴(yán)格選種，盡量保留血統(tǒng)或家系，不輕易淘汰家系。主要依據(jù)體重和窩產(chǎn)仔數(shù)選留種豬，體重向下分階段選擇，實行各家系等數(shù)留種。在每個世代中，每個父系家系留1頭公豬，每個母系家系留下1頭母豬，通過選優(yōu)法進(jìn)行選種。
2．1．4 世代間隔 一般在初產(chǎn)母豬的頭胎仔豬中選留種豬組成下一世代。
2．2 近交系選育
2．2．1 組建家系通過毛色、系譜記錄和種豬檔案資料，分析種豬血緣、生產(chǎn)繁殖性能情況，在引
種群挑選種豬組建近交黑系群和白系群。
2．2．2 近親繁育采用全同胞輔以親子交配進(jìn)行近親繁育以加快基因純合速度：留存的每個家系，都
可以擴(kuò)繁成一個近交系。
2．2．3 選種方法采用家系內(nèi)個體選擇的方法，主要根據(jù)體重分階段向下選擇，以2月齡和配種前選
擇為主。
2．2．4 世代間隔盡量縮短世代間隔，一般在初產(chǎn)母豬的頭胎仔豬中選留種豬，后備豬6月齡左右參
力口酉己種。
2．3 生物學(xué)特性研究
從生長發(fā)育、繁殖學(xué)、血液生理生化、解剖、分子生物學(xué)等方面對生物學(xué)特性進(jìn)行研究，
深入、全面地分析五指山小型豬潛在的遺傳品質(zhì)，進(jìn)一步明確其生物學(xué)特性，以促進(jìn)五指山小型豬的
保種選育和實驗動物化進(jìn)程。
2．4 實驗動物化基礎(chǔ)研究
采用常規(guī)檢驗方法進(jìn)行微生物、寄生蟲檢測，掌握種群的病原生物感染狀況，以利于開展
質(zhì)量監(jiān)測和生物凈化工作。同時，逐步將封閉群五指山小型豬用于疫苗安全評價中，為五指山小型
豬作為疫苗檢驗用標(biāo)準(zhǔn)化實驗動物積累基礎(chǔ)資料。
2．5 遺傳檢測
利用多重?zé)晒釶CR．基因組掃描技術(shù)對封閉群和近交選育群五指山小型豬26個微衛(wèi)星基因座進(jìn)行
遺傳檢測，對封閉群的基因異質(zhì)性和近交選育群的基因純合度進(jìn)行分析，以期為進(jìn)一步選育提供科學(xué)依據(jù)。
2．6 實驗豬標(biāo)準(zhǔn)化研究應(yīng)用
鑒于我國目前尚未制定出臺實驗豬生物學(xué)特性數(shù)據(jù)測定技術(shù)規(guī)程，依據(jù)“實驗動物資源共性描
述規(guī)范”的基本內(nèi)容和總體要求，本著科學(xué)性、實用性的原則，結(jié)合實驗豬特點，制訂“實驗用
五指山小型豬生物學(xué)特性數(shù)據(jù)測定技術(shù)規(guī)程”， 以規(guī)范各類數(shù)據(jù)的測定過程和技術(shù)要求。
根據(jù)實驗用豬的特點，從提高產(chǎn)品質(zhì)量和保障動物福利角度出發(fā)，借鑒先進(jìn)的研究成果和經(jīng)驗，
提出相應(yīng)的飼養(yǎng)管理技術(shù)操作規(guī)程， 以形成實驗用五指山小型豬各階段的規(guī)范化配套飼養(yǎng)技術(shù)。
3 結(jié)果
3．1 封閉群選育結(jié)果
經(jīng)系統(tǒng)整理、選育和培育，建立了實驗用五指山小型豬封閉群，并繁育二代。核心群共有公
豬14頭，母豬30頭；生產(chǎn)群共有公豬9頭，母豬60頭。測定結(jié)果表明，頭胎窩產(chǎn)仔數(shù)6．35±1．53
頭、多胎窩產(chǎn)仔數(shù)7．47±1．96頭，實驗豬初生重0．57±0．1 1 kg，6月齡體重、體高、體長、胸圍分
別為12．11±2．99 kg、32．64±3．81 cm、52．13±5．43 cm和50．64±5．77 cm，保持了體型矮小的特性，繁殖性能與實驗豬標(biāo)準(zhǔn)化程度提高，可滿足多種研究領(lǐng)域的需求，經(jīng)省級實驗動物質(zhì)量監(jiān)督檢
測機(jī)構(gòu)檢測，各項指標(biāo)符合普通級實驗動物豬標(biāo)準(zhǔn)【SCXK(粵)2008．0022]。
3．2 近交系選育結(jié)果
建立了兩個近交選育群，黑系群共有種豬25頭，白系群共有種豬18頭。近交選育群在引進(jìn)基
礎(chǔ)上又分別近交了二代和三代，平均基因純合率為56．57％，基因純合度得到進(jìn)一步提高，體型外貌
一致，性能趨于穩(wěn)定。其中，黑系群體型較小，近交代數(shù)高，基因位點純合性高；白系群體型稍
大，全身皮膚白色，性情溫順。
3．3 生物學(xué)特性研究
系統(tǒng)測定了實驗用五指山小型豬的繁殖性能、生長發(fā)育、血液生理生化指標(biāo)[?1、臟器系數(shù)【12l、
下頜骨參數(shù)【l3，l4】等生物學(xué)基礎(chǔ)數(shù)據(jù)，獲取基本信息、生理、生化、遺傳、解剖等數(shù)據(jù)7萬多個。
研究證明五指山小型豬是理想的實驗動物資源，具有廣泛的適應(yīng)性，適合在我國不同氣候環(huán)境、飼
養(yǎng)條件下飼養(yǎng)繁育。
3．4 實驗動物化基礎(chǔ)研究
采集血清和皮膚樣本，用血清學(xué)和顯微鏡觀察方法進(jìn)行6項微生物和體表寄生蟲學(xué)指標(biāo)的檢
測。結(jié)果表明：封閉群五指山小型豬疫苗免疫良好，無烈性病原生物感染，主要傳染病原的抗體
陰性，滿足普通級小型豬的指標(biāo)要求，具有選育、凈化升級和應(yīng)用的良好基礎(chǔ)。選用1—2月齡豬繁殖與呼吸綜合征病毒抗體陰性的普通級實驗用五指山小型豬與大型瘦肉型商品雜交豬對比，進(jìn)行繁殖與呼吸綜合征病毒疫苗安全性評價試驗。結(jié)果表明，五指山小型豬抗體產(chǎn)生時問早于大型豬，抗體產(chǎn)生的一致性好，顯示五指山小型豬在安全性評價試驗中敏感性較高。
3．5 遺傳質(zhì)量檢測
選用26個微衛(wèi)星基因座對封閉群和近交選育群遺傳檢測結(jié)果顯示，在五指山小型豬全群中，平均檢測到9．93個等位基因；在封閉群中，平均檢測到8．37個等位基因；在近交選育群中平均檢測到6．92個等位基因。五指山小型豬全群平均多態(tài)信息含量為0．6949，平均雜合度為0．5391：封閉群平均多態(tài)信息含量為0．7069，平均雜合度為0．5478；近交選育群平均基因純合率為56．57％，平均多態(tài)信息含量為0．6042，平均雜合度為0．4478。表明五指山小型豬封閉群具有豐富的遺傳多樣性，保持了引種群的遺傳異質(zhì)性；近交選育群經(jīng)選育具有較高的遺傳純度和穩(wěn)定性。
3．6 標(biāo)準(zhǔn)化研究應(yīng)用
生產(chǎn)采用封閉式豬舍、高床飼養(yǎng)、自動飲水、水簾降溫、紅外取暖、分階段飼養(yǎng)等先進(jìn)工藝和嚴(yán)格的環(huán)境與質(zhì)量控制技術(shù)，提出具有實用性、科學(xué)性和先進(jìn)性的實驗用五指山小型豬生物學(xué)特性數(shù)據(jù)測定技術(shù)規(guī)程與飼養(yǎng)管理技術(shù)操作規(guī)程，并在生產(chǎn)與研究中應(yīng)用，促進(jìn)了實驗用五指山小型豬生產(chǎn)繁育和研究的規(guī)范化與標(biāo)準(zhǔn)化。
3．7 推廣應(yīng)用
先后向不同單位提供實驗用豬，用于組織培養(yǎng)、豬用疫苗檢驗、藥理藥效學(xué)實驗、皮膚、外科、心臟、血管、放射治療和牙科實驗等， 用戶普遍反映該豬參考指標(biāo)穩(wěn)定，特點明顯。
方法
2．1 封閉群選育
2．1．1 組建核心群和生產(chǎn)群核心群根據(jù)引種群種豬的來源和血統(tǒng)嚴(yán)格挑選， 由l4頭公豬和30頭母
豬組成。主要用于保種選育和為生產(chǎn)群提供種豬。生產(chǎn)群由引進(jìn)的其它種豬以及核心群生產(chǎn)的種
豬組成。生產(chǎn)普通級實驗動物，用于生產(chǎn)性能測定、獸醫(yī)生物制品檢定和生物醫(yī)藥實驗等。
2．1．2 實行閉鎖繁育豬群嚴(yán)格閉鎖，不再引進(jìn)任何外來種豬，后備豬均來自封閉群后代。為控制每代近交系數(shù)上升速度，采用避免全同胞交配的不完全隨機(jī)交配。
2．1．3 選種方法盡量保持每個世代的個體處于相同的飼養(yǎng)管理條件下，然后根據(jù)自身成績結(jié)合同胞資料進(jìn)行嚴(yán)格選種，盡量保留血統(tǒng)或家系，不輕易淘汰家系。主要依據(jù)體重和窩產(chǎn)仔數(shù)選留種豬，體重向下分階段選擇，實行各家系等數(shù)留種。在每個世代中，每個父系家系留1頭公豬，每個母系家系留下1頭母豬，通過選優(yōu)法進(jìn)行選種。
2．1．4 世代間隔 一般在初產(chǎn)母豬的頭胎仔豬中選留種豬組成下一世代。
2．2 近交系選育
2．2．1 組建家系通過毛色、系譜記錄和種豬檔案資料，分析種豬血緣、生產(chǎn)繁殖性能情況，在引
種群挑選種豬組建近交黑系群和白系群。
2．2．2 近親繁育采用全同胞輔以親子交配進(jìn)行近親繁育以加快基因純合速度：留存的每個家系，都
可以擴(kuò)繁成一個近交系。
2．2．3 選種方法采用家系內(nèi)個體選擇的方法，主要根據(jù)體重分階段向下選擇，以2月齡和配種前選
擇為主。
2．2．4 世代間隔盡量縮短世代間隔，一般在初產(chǎn)母豬的頭胎仔豬中選留種豬，后備豬6月齡左右參
力口酉己種。
2．3 生物學(xué)特性研究
從生長發(fā)育、繁殖學(xué)、血液生理生化、解剖、分子生物學(xué)等方面對生物學(xué)特性進(jìn)行研究，
深入、全面地分析五指山小型豬潛在的遺傳品質(zhì)，進(jìn)一步明確其生物學(xué)特性，以促進(jìn)五指山小型豬的
保種選育和實驗動物化進(jìn)程。
2．4 實驗動物化基礎(chǔ)研究
采用常規(guī)檢驗方法進(jìn)行微生物、寄生蟲檢測，掌握種群的病原生物感染狀況，以利于開展
質(zhì)量監(jiān)測和生物凈化工作。同時，逐步將封閉群五指山小型豬用于疫苗安全評價中，為五指山小型
豬作為疫苗檢驗用標(biāo)準(zhǔn)化實驗動物積累基礎(chǔ)資料。
2．5 遺傳檢測
利用多重?zé)晒釶CR．基因組掃描技術(shù)對封閉群和近交選育群五指山小型豬26個微衛(wèi)星基因座進(jìn)行
遺傳檢測，對封閉群的基因異質(zhì)性和近交選育群的基因純合度進(jìn)行分析，以期為進(jìn)一步選育提供科學(xué)依據(jù)。
2．6 實驗豬標(biāo)準(zhǔn)化研究應(yīng)用
鑒于我國目前尚未制定出臺實驗豬生物學(xué)特性數(shù)據(jù)測定技術(shù)規(guī)程，依據(jù)“實驗動物資源共性描
述規(guī)范”的基本內(nèi)容和總體要求，本著科學(xué)性、實用性的原則，結(jié)合實驗豬特點，制訂“實驗用
五指山小型豬生物學(xué)特性數(shù)據(jù)測定技術(shù)規(guī)程”， 以規(guī)范各類數(shù)據(jù)的測定過程和技術(shù)要求。
根據(jù)實驗用豬的特點，從提高產(chǎn)品質(zhì)量和保障動物福利角度出發(fā)，借鑒先進(jìn)的研究成果和經(jīng)驗，
提出相應(yīng)的飼養(yǎng)管理技術(shù)操作規(guī)程， 以形成實驗用五指山小型豬各階段的規(guī)范化配套飼養(yǎng)技術(shù)。
3 結(jié)果
3．1 封閉群選育結(jié)果
經(jīng)系統(tǒng)整理、選育和培育，建立了實驗用五指山小型豬封閉群，并繁育二代。核心群共有公
豬14頭，母豬30頭；生產(chǎn)群共有公豬9頭，母豬60頭。測定結(jié)果表明，頭胎窩產(chǎn)仔數(shù)6．35±1．53
頭、多胎窩產(chǎn)仔數(shù)7．47±1．96頭，實驗豬初生重0．57±0．1 1 kg，6月齡體重、體高、體長、胸圍分
別為12．11±2．99 kg、32．64±3．81 cm、52．13±5．43 cm和50．64±5．77 cm，保持了體型矮小的特性，繁殖性能與實驗豬標(biāo)準(zhǔn)化程度提高，可滿足多種研究領(lǐng)域的需求，經(jīng)省級實驗動物質(zhì)量監(jiān)督檢
測機(jī)構(gòu)檢測，各項指標(biāo)符合普通級實驗動物豬標(biāo)準(zhǔn)【SCXK(粵)2008．0022]。
3．2 近交系選育結(jié)果
建立了兩個近交選育群，黑系群共有種豬25頭，白系群共有種豬18頭。近交選育群在引進(jìn)基
礎(chǔ)上又分別近交了二代和三代，平均基因純合率為56．57％，基因純合度得到進(jìn)一步提高，體型外貌
一致，性能趨于穩(wěn)定。其中，黑系群體型較小，近交代數(shù)高，基因位點純合性高；白系群體型稍
大，全身皮膚白色，性情溫順。
3．3 生物學(xué)特性研究
系統(tǒng)測定了實驗用五指山小型豬的繁殖性能、生長發(fā)育、血液生理生化指標(biāo)[?1、臟器系數(shù)【12l、
下頜骨參數(shù)【l3，l4】等生物學(xué)基礎(chǔ)數(shù)據(jù)，獲取基本信息、生理、生化、遺傳、解剖等數(shù)據(jù)7萬多個。
研究證明五指山小型豬是理想的實驗動物資源，具有廣泛的適應(yīng)性，適合在我國不同氣候環(huán)境、飼
養(yǎng)條件下飼養(yǎng)繁育。
3．4 實驗動物化基礎(chǔ)研究
采集血清和皮膚樣本，用血清學(xué)和顯微鏡觀察方法進(jìn)行6項微生物和體表寄生蟲學(xué)指標(biāo)的檢
測。結(jié)果表明：封閉群五指山小型豬疫苗免疫良好，無烈性病原生物感染，主要傳染病原的抗體
陰性，滿足普通級小型豬的指標(biāo)要求，具有選育、凈化升級和應(yīng)用的良好基礎(chǔ)。選用1—2月齡豬繁殖與呼吸綜合征病毒抗體陰性的普通級實驗用五指山小型豬與大型瘦肉型商品雜交豬對比，進(jìn)行繁殖與呼吸綜合征病毒疫苗安全性評價試驗。結(jié)果表明，五指山小型豬抗體產(chǎn)生時問早于大型豬，抗體產(chǎn)生的一致性好，顯示五指山小型豬在安全性評價試驗中敏感性較高。
3．5 遺傳質(zhì)量檢測
選用26個微衛(wèi)星基因座對封閉群和近交選育群遺傳檢測結(jié)果顯示，在五指山小型豬全群中，平均檢測到9．93個等位基因；在封閉群中，平均檢測到8．37個等位基因；在近交選育群中平均檢測到6．92個等位基因。五指山小型豬全群平均多態(tài)信息含量為0．6949，平均雜合度為0．5391：封閉群平均多態(tài)信息含量為0．7069，平均雜合度為0．5478；近交選育群平均基因純合率為56．57％，平均多態(tài)信息含量為0．6042，平均雜合度為0．4478。表明五指山小型豬封閉群具有豐富的遺傳多樣性，保持了引種群的遺傳異質(zhì)性；近交選育群經(jīng)選育具有較高的遺傳純度和穩(wěn)定性。
3．6 標(biāo)準(zhǔn)化研究應(yīng)用
生產(chǎn)采用封閉式豬舍、高床飼養(yǎng)、自動飲水、水簾降溫、紅外取暖、分階段飼養(yǎng)等先進(jìn)工藝和嚴(yán)格的環(huán)境與質(zhì)量控制技術(shù)，提出具有實用性、科學(xué)性和先進(jìn)性的實驗用五指山小型豬生物學(xué)特性數(shù)據(jù)測定技術(shù)規(guī)程與飼養(yǎng)管理技術(shù)操作規(guī)程，并在生產(chǎn)與研究中應(yīng)用，促進(jìn)了實驗用五指山小型豬生產(chǎn)繁育和研究的規(guī)范化與標(biāo)準(zhǔn)化。
3．7 推廣應(yīng)用
先后向不同單位提供實驗用豬，用于組織培養(yǎng)、豬用疫苗檢驗、藥理藥效學(xué)實驗、皮膚、外科、心臟、血管、放射治療和牙科實驗等， 用戶普遍反映該豬參考指標(biāo)穩(wěn)定，特點明顯。
