(六) 體外受精
體外受精的完成需要一個(gè)有利于精子和卵子存活的培養(yǎng)系統(tǒng)。目前,用于卵母細(xì)胞體受精的培養(yǎng)系統(tǒng)主要包括微滴法和四孔培養(yǎng)板法兩類。
1. 微滴法
這是一種應(yīng)用最廣的培養(yǎng)系統(tǒng)。具體做法是在塑料培養(yǎng)皿中用受精液做成20～40µl微滴,上覆石蠟油,然后每滴放入體外成熟的卵母細(xì)胞 10～20 枚及獲能處理的精子(1.0～1.5)×106個(gè)/ml,在培養(yǎng)箱中孵育 6～24h。該法的優(yōu)點(diǎn)是受精液及精液的用量均較少,體外受精的效果亦較好;缺點(diǎn)是受精的結(jié)果易受石蠟油質(zhì)量的影響,操作亦相對(duì)較繁瑣,成本也相對(duì)較高。
2. 四孔培養(yǎng)板法
該法是采用四孔培養(yǎng)板作為體外受精的器皿,每孔加入500µl受精液和 100～150 制成熟的卵母細(xì)胞,然后加人獲能處理的精子(1.0-1.5)×106個(gè)/時(shí),而后在培養(yǎng)箱中孵育24h。該法的優(yōu)點(diǎn)是操作相對(duì)比較簡(jiǎn)單,受精結(jié)果不受石蠟泊質(zhì)量的影響;缺點(diǎn)是精子的利用率相對(duì)較低,體外受精效果不如微滴法穩(wěn)定。