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動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù):實(shí)驗(yàn)動(dòng)物麻醉技術(shù)

來源:動(dòng)物實(shí)驗(yàn)發(fā)布時(shí)間:2015-10-29 09:49:18

許多研究工作者在實(shí)驗(yàn)過程中需要麻醉動(dòng)物,以進(jìn)行外科手術(shù)、采血、采樣等技術(shù),但往往因操作者對(duì)麻醉程序及藥品了解不夠,使得過程中增加許多不便,不但浪費(fèi)了時(shí)間、金錢,甚至造成了結(jié)果的誤判?;诖?,作者收集有關(guān)嚙齒類實(shí)驗(yàn)動(dòng)物(小鼠、大鼠、天竺鼠、倉鼠)、兔子、犬、貓、豬、羊、靈長類等動(dòng)物之麻醉劑量、注射方式及各種麻醉藥品之一般藥性,分為上下兩篇:介紹術(shù)前、術(shù)后注意事項(xiàng)及9大類、25種常用鎮(zhèn)靜麻醉藥品劑量、注射方式及注意事項(xiàng)。以下已條列式詳細(xì)介紹實(shí)驗(yàn)動(dòng)物依般麻醉技術(shù)及藥品。
動(dòng)物實(shí)驗(yàn) 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物培養(yǎng)
壹、術(shù)前照顧
一、禁食期要足夠
1. 犬、貓、靈長類、豬,8-12小時(shí)。
2. 小型囓齒動(dòng)物及兔不易發(fā)生嘔吐,所以一般手術(shù)前不需要禁食。
3. 任何種類之懷孕動(dòng)物麻醉前最好禁食,但在反芻動(dòng)物可能會(huì)引起玫死性代謝障礙。
4. 反芻獸禁食對(duì)瘤胃中消化液無影響,除非長期禁食3-4天;短期禁食(12-24小時(shí))可降低瘤胃鼓漲發(fā)生機(jī)會(huì)。
二、必須有急診,緊急處理(Intensive care)之概念。
麻醉過程終常出現(xiàn)呼吸停止、心跳停止等現(xiàn)象,視需要可準(zhǔn)備Atropine, CaCl2 10% ,Dexamethasone, Dopamine, Doxapram, Epinephrine, Sodium Bicarbonate等急救藥物。
貳、麻醉藥品介紹:
一、抗乙酰膽堿性藥物(Anticholinergices)
A) Artopine
作用:
1.抑制呼吸道及唾液腺分泌物。
2.防上心臟受到迷走神經(jīng)興奮所產(chǎn)生之心跳徐緩。
副作用:
1.心跳速率增加時(shí)避免使用。
2.心臟手術(shù)時(shí),避免使用。
3.某些品系的貓、大鼠、兔,會(huì)分解此藥。
二、鎮(zhèn)靜劑(Tranquilizers and Sedatives)
A)Phenothiazines:
Chlorpromazine(原型)
Acepromazine(使用最廣泛)
Promazine(最安全)
作用:
1.抑制腦干及大腦皮質(zhì),產(chǎn)生安靜和減低運(yùn)動(dòng)性作用。
2.抑制嘔吐。
3.和麻醉性止痛劑并用,形成神經(jīng)性安定鎮(zhèn)痛藥。
副作用:
1.因血管擴(kuò)張而造成血壓降低。
2.溫度調(diào)節(jié)受抑制,易產(chǎn)生體溫降低。
3.高劑量時(shí)之肌肉僵直、震顫等現(xiàn)象。
注意:
1.脫水、出血或任何體液不平衡現(xiàn)象,使用此藥物要小心。
2.可與解離性麻醉劑何用,改善副作用。
B)Butyrophenones:
Droperidol
Fluanisone
Azaperone(豬較常用)
作用:
1.效果比Phenothiazine類強(qiáng)。
2.抑制嘔吐。
3.和麻醉性止痛劑并用形成神經(jīng)性安定鎮(zhèn)定劑。
副作用:
1.錐體外運(yùn)動(dòng)現(xiàn)象-肌肉僵硬、震顫等癥狀。
注意:
1.低血壓現(xiàn)象易發(fā)生。
2.Droperidol及Fluanisone常用于精神性安定鎮(zhèn)痛藥。
C)Benzodiazepines:
Diazepam(最常用,簡稱Valim)
Midazolam
作用:
1.控制及預(yù)防癲癇發(fā)作。
2.作用于腦之邊緣系統(tǒng),尤其是海馬角部份。
3.可使用于老年、肥胖、患心血管疾病之動(dòng)物。
4.解除貓因Ketamine所引起之痙攣,但不可混合注射。
副作用:
1.靜脈注射太快,引起心跳徐緩、血壓降低及呼吸停止等現(xiàn)象。
2.皮下或肌肉注射效果不佳,且刺激組織。
注意:
1.未為美國食品與藥物管理局(FDA)認(rèn)可使用于動(dòng)物。
D)Alpha-2-Aderenergic Agonist Tranquillizers:
Xylazine(簡稱Rompun)
作用:
1.使用于反芻獸、馬、貓、靈長類等動(dòng)物。
2.可與Ketamin、其它鎮(zhèn)定劑、局部麻醉劑或笑氣合用。
副作用:
1.刺激嘔吐中樞,引起嘔吐,可使90%貓發(fā)生嘔吐。
2.高劑量有嚴(yán)重心血管及呼吸功能抑制,尤其是與Barbiturates或Alpha-Xalone/Alphadolone合用時(shí)。
注意:
1.勿使用于已有心律不整之動(dòng)物。
2.可引起高血糖癥和體溫下降。
三、麻醉性止痛劑(Narcotic Analgesics)
A)Morphine, Pethidine, Buprenorphine, Methadone, Fentany1, Etorphine
作用:
1. 因人類之癮性,屬管制藥品,又稱鴉片類止痛劑。獸醫(yī)使用上受限制。
2. 精神性安定鎮(zhèn)痛作用。
副作用:
1.高劑量下之呼吸抑制現(xiàn)象及嘔吐(犬、靈長類)。
2.體溫降低,減少心跳速率,降低血壓。
3.可刺激動(dòng)物排便/嘔吐。
注意:
1. 低劑量可引起中樞神經(jīng)抑制現(xiàn)象,較高劑量可產(chǎn)生興奮,很高的劑量繼而再抑制,隨后昏迷而死亡。
參、麻醉
一、局部麻醉
A)Procaine
作用:
1.藉阻斷感覺及運(yùn)動(dòng)神經(jīng)的傳導(dǎo)功能,使身體局部區(qū)域的感覺暫時(shí)消失及肌肉呈松馳現(xiàn)象,但不影響意識(shí)作用。
2.短時(shí)效,30~60分鍾。
副作用:
1.使用于小動(dòng)物如貓、兔、鼠類,易過量而造成痙攣、心跳停止現(xiàn)象。
2.酯型藥物在血漿內(nèi)易被偽乙酰膽堿酵素(Pseudocholinesterase)水解。
注意:
1.應(yīng)用于大型動(dòng)物如牛、馬或老年動(dòng)物。
2.實(shí)施磺胺劑治療之動(dòng)物禁止使用,因妨礙對(duì)磺胺劑敏感的細(xì)菌利用對(duì)位氨基苯酸的效果。
B)Lidocaine
作用:
1.酰胺型局部麻醉劑。
2.中等時(shí)效,90~180分鐘。
副作用:
1.不易提供人道,無緊迫之外科保定,必須合用低劑量之鎮(zhèn)靜或麻醉劑。
2.大量使用時(shí),延遲傷口愈合時(shí)間。
注意:
1.當(dāng)動(dòng)物有低血壓、循環(huán)不良、心跳徐緩現(xiàn)象時(shí),避免使用。
2.術(shù)部有感染或血液供應(yīng)不良時(shí),不宜使用。
二、全身麻醉
(一)氣體麻醉
A) Ether(Diethy1-Ether)
作用:在簡單之容器中極易蒸發(fā)。
副作用:
1.具刺激性味道,導(dǎo)致咳嗽、支氣管及唾液分泌增加、咽喉痙攣。
2.使原先存在的慢性呼吸道疾病突然轉(zhuǎn)為急性炎癥反應(yīng),在囓齒類及免尤其明顯。
3. 遇氧易燃、易爆。
注意:
1.麻醉誘導(dǎo)期及恢復(fù)期較慢。血糖升高,不建議用于天竺鼠。
2.以乙醚安樂死并置于冰箱保存之屠體易造成爆炸的導(dǎo)火線。
3.傳統(tǒng)之麻醉箱,考慮使用Methoxyflurane代替Ether。
B) Halothane
作用:
1.非常容易蒸發(fā)。
2.誘導(dǎo)及恢復(fù)快(1~3分鐘)。
3.不易燃燒或爆炸。
副作用:
1.心血管功能抑制及因周邊血管擴(kuò)張所造成之低血壓。
2.高劑量下對(duì)呼吸抑制。
3.此藥須經(jīng)肝臟代謝。
注意:
1.對(duì)大多數(shù)動(dòng)物而言是極佳的氣體吸入麻醉劑。
2.必須使用氣體麻醉機(jī),避免過量。
3.長期暴露于Halothane下,易造成肝功能不佳。
C) Enflurane
作用:
1.誘導(dǎo)期及恢復(fù)期相當(dāng)快,麻醉深度淺而易受干擾。
2.不易燃燒及爆炸。
副作用:
1.與Halothane比較,同樣有心血管及呼吸功能抑制作用。
注意:
1.大部份藉由肺臟排出,而不經(jīng)肝臟代謝。此可提供特殊條件下之需要。
D) Isoflutane
作用:
1.誘導(dǎo)期恢復(fù)相當(dāng)快,麻醉深度淺而易受干擾。
2.不易燃燒及爆炸。
副作用:
1.呼吸抑制作用較Halothane嚴(yán)重,心血管功能抑制較小。
2.刺激性味道易迼成暫時(shí)呼吸停止。
注意:
1.生化轉(zhuǎn)換作用較Enflurane小,幾乎完全藉呼出廢氣排出。
2.對(duì)肝粒線體酵素影響很小。
3.對(duì)藥物代謝或毒理試驗(yàn)非常適合。
E) Methoxyflurane
作用:
1.不易燃、不易爆炸。
2.止痛效果佳,并具有術(shù)后止痛作用。
副作用;
1.與 halothane比較,具有較輕微之呼吸及心血管功能抑制作用。
2.此藥物在體內(nèi)代謝會(huì)產(chǎn)生氟化物對(duì)腎臟造成傷害。
注意:
1.因誘導(dǎo)期慢,在較大型的動(dòng)物建議先以短效注射麻醉,再以此藥作維持麻醉。
2.對(duì)初生動(dòng)物麻醉,此藥效果極佳。
3.對(duì)小型動(dòng)物施以麻醉箱內(nèi)麻醉,較不易有過量危險(xiǎn)。
F) Chloroform
作用:
1.便宜,不易燃燒、不易爆炸。
副作用:
1.對(duì)心臟、腎臟、肝臟具毒性。
2.在深度麻醉下易發(fā)生心肺功能衰竭。
3.易發(fā)生手術(shù)后肺炎。
注意:
1.不適合實(shí)驗(yàn)使用。
2.除上述副作用之外,低劑量下可造成公鼠不孕癥。
G) Trichlorethylene
作用:
1.便宜,不易燃燒,不易爆炸。
2.止痛效果佳,心血管功能抑制小。
副作用:
1.肌肉松馳效果差。在蘇打右灰存在下易解離形成毒性及燃爆物,所以絕不可以用于密死循環(huán)境中。
2.易造成呼吸速率增加及潮氣量減低,使得血碳酸過高。
3.經(jīng)肝臟代謝,易造成肝功能受損。
注意:
1.僅適用于輕度麻醉。
2.具肝臟致癌性。
3.高劑量下抑制呼吸功能。
H) Nitrous Xxide
作用:
1.心血管功能及呼吸功能抑制小。
副作用:
1.因?qū)粑靶难芄δ芤种菩。膳c其它氣體合用,例如以50:50或60:40比率與氧氣混合。
2.麻醉術(shù)后,最好能以100%氧氣給動(dòng)物呼吸,避免因Nitrous Oxide迅速由血液至肺泡所造成之全面缺氧。
3.止痛效果差,避免單獨(dú)與神經(jīng)阻斷劑共享。
4.主要效用在與其它副作用大,但麻醉效果強(qiáng)之藥劑共享,并降低其使用量。
I) Cyclopropane
作用:
1.麻醉誘導(dǎo)期及恢復(fù)快。
2.麻醉淺易受干擾。
副作用:
1.易造成呼吸抑制,心律不整。
2.易燃、易爆炸。
注意:
1.昂貴,主要在密閉箱中麻醉。
2.具燃爆之危險(xiǎn)性,限制其用途。
(二)注射性麻醉
A) 巴比妥鹽類(Barbiturates)
Pentobarbitone, Thiopentone, Methohexitone, Inactin
作用:
1.全身癲醉,抗痙攣性治療,鎮(zhèn)靜作用。
2.血液中藥物重分布現(xiàn)象。
副作用:
1.嚴(yán)重之呼吸及心血管抑制作用,有短的呼吸停作用,尤其是貓。
2.止痛作用較差。
3.不適用于肝、腎疾病的動(dòng)物。
注意:
1.不適用于剖腹產(chǎn)手術(shù),因抑制子宮內(nèi)胎兒呼吸,造成高死亡率。
2.無法提供充份的腹壁肌肉松馳。
3.避免注射于血管外組織。
B) Steroid Anaesthetics:
Alphaxalone / Alphadolone
作用:
1.誘導(dǎo)作用溫和,重復(fù)劑量注射對(duì)恢復(fù)期影響不大。
2.應(yīng)用于綿羊、豬、靈長類、貓、囓齒類。
副作用:
1.麻醉藥中某些成分會(huì)使經(jīng)注射后之犬,大量釋出組織胺,造成過敏反應(yīng),貓亦有此反應(yīng),但較輕微。
注意:
1.經(jīng)腹腔或肌肉注射后效果變異極大。代謝快,適合作長效性維持麻醉。
2.對(duì)兔的止痛效果差,高劑量下易造成呼吸抑制。
3.不可與Barbiturates共享。
C) 解離型麻醉劑(Dissociatve Anaesthethetics):
Ketamine
作用:
1.止痛,四肢僵直反應(yīng),對(duì)外界物理性刺激失去反應(yīng)。
2.與Xylazine或Diazepam合用,可廣泛應(yīng)用于反芻獸、靈長類、貓、兔及倉鼠。
副作用:
1.肌肉呈伸直僵強(qiáng)狀態(tài),不適用于需牽引大塊肌肉組織之手術(shù)。
2.肝腎功能不佳時(shí),避免使用。
3.呼吸不規(guī)則及過度流涎現(xiàn)象發(fā)生。
注意:
1.具麻醉作用是阻斷腦中資料由無知覺部份送至有知覺部份,為漸進(jìn)性刺激中樞神經(jīng)而非抑制,又稱解離型麻醉劑。
D) 精神安定鎮(zhèn)痛劑 (Neuroleptanalgesics):
Fentany1 / Fluanisone
Fentany1 / Droperido1
Etorphine / Methotrimeprazine
Etorphine / Acepromazine
作用:
1.拮抗麻醉性止痛劑之惡心、嘔吐等不良反應(yīng)。
2.可與全身麻醉劑合用,引起協(xié)合麻醉。
副作用:
1.聽覺對(duì)刺激特別敏感。
2.呼吸抑制及可能引起呼吸暫停。
3.陣發(fā)性痙攣或伸肌強(qiáng)硬。
4.血壓降低及心跳徐緩。
注意:
1.精神安定劑(Neuroleptic)與麻醉性止痛劑合用時(shí),可考慮并用Benzodiazepines,一方面降低使用劑量50~70%,另一方面一旦麻醉性止痛劑過量,可以Naloxone 或 Buprenorphine拮抗。
E) 其它麻醉劑
I. Tribromoerhanol
作用:
1.對(duì)大部份之囓齒動(dòng)物具麻醉效果,有很好之肌肉松馳作用。
副作用:
1.刺激腹膜
注意:
1.儲(chǔ)存液放過久時(shí),一旦行腹腔注射易刺激腹膜而迼成腹壁黏連,使日后注射其它麻醉劑時(shí)易造成高死亡率。
II. Chloral Hydrate
作用:
1.長時(shí)間(1~2小時(shí))穩(wěn)定之輕度麻醉。對(duì)心血管系統(tǒng)影響小。
副作用:
1.此藥中毒劑量接近麻醉劑量,僅使用于牛、馬,極少用于其它動(dòng)物。
III. Alpha-Chloralose
作用:
1.長時(shí)間(8~10小時(shí))輕度麻醉,心血管及呼吸功能抑制作用小。
副作用:
1.止痛效果差。
注意:
1.建議用于無痛,需長期麻醉之小手術(shù)條件下。可先以短效性、效力強(qiáng)之麻醉劑注射達(dá)到外科麻醉之深度,再以Alpha-chloralose作維持麻醉。
IV. Urethane
作用:
1.長時(shí)間(8~10小時(shí))麻醉,而具輕微心血管,呼吸功能抑制作用。
副作用:
1.Urethane為致癌物。
注意:
1.與Chloralose類似,具有長效穩(wěn)定之麻醉作用,且止痛效果亦足夠應(yīng)用于小型囓齒類。但因Urethane為致癌物,操作者及經(jīng)處理過之動(dòng)物必須小心。
肆、術(shù)后照顧
一、恢復(fù)期
1.體溫調(diào)節(jié)中樞在術(shù)后暫時(shí)失控,所以應(yīng)維持成年動(dòng)物27~30℃之間,幼年或新生動(dòng)物在35~37℃之間。
2.盡可能準(zhǔn)備安靜、保溫之籠舍供動(dòng)物靜臥,恢復(fù)至正常。囓齒類或兔之籠舍內(nèi)不要放鋸屑或木屑,避免動(dòng)物沾或吸入鼻口腔、眼。
3.,可使用人工合成綿羊皮、毛巾、毛毯、紙巾作為動(dòng)保暖之覆蓋物。
4.兔、天竺鼠在恢復(fù)期盡放在硬紙盒中,避免放于網(wǎng)狀籠中,且避免打擾。
5.動(dòng)物無持干燥、干潔。
二、恢復(fù)其之可能危險(xiǎn)
1.吞咽及咳嗽反射漸漸回復(fù)。非反芻獸動(dòng)物盡量側(cè)臥,并協(xié)助將其頭頸伸直,避免呼吸道阻塞。
2.側(cè)臥4小時(shí)以上,應(yīng)翻另一側(cè),避免肺臟郁血及重力性肺炎。
3.犬、經(jīng)濟(jì)動(dòng)物,必要時(shí),睕、飛關(guān)節(jié)予以按摩或加以襯墊。
4.如果動(dòng)物嘔吐,盡量將頭部置于低于胸部及腹部之位置,避免吸入嘔吐物。必要時(shí),以壓力吸槍清洗口腔、咽喉。
5.反芻獸避免瘤胃過度漲氣或擴(kuò)張。
6.注意觀察呼吸,必要時(shí)以Doxapram刺激呼吸,或給予氧氣。
7.輸液療法
正常動(dòng)物每日需要40~80ml/kg輸液,當(dāng)動(dòng)物清醒時(shí),以口服方式給予,如果不行,改以皮下或腹腔注射,常用之液體如下:
(1)含4%葡萄糖與0.18%生理食鹽水溶液。
(2)含0.9%之生理食鹽水,因嘔吐/下痢引起之代謝性堿血癥。
(3)葡萄糖溶液,共給幼年及糖尿病動(dòng)物。
(4)乳酸林格氏液對(duì)大多數(shù)外科手術(shù)后動(dòng)物適用。
(5)含2.5%葡萄糖與0.45%生理食鹽水溶液,適用于依般外科手術(shù)或麻醉前有輕微厭食或脫水之動(dòng)物。
8.小型實(shí)驗(yàn)動(dòng)物之傷口,易受糞、尿、土壤、墊料污染,必要時(shí)使用抗生素預(yù)防感染。
三、術(shù)后疼痛之處理
1.動(dòng)物或許對(duì)疼痛之耐受性與人類不同,但外科手術(shù)對(duì)動(dòng)物而言絕非舒服之感覺。
2.疼痛會(huì)引起許多一連串的生理反應(yīng),是否使用止痛劑對(duì)研究學(xué)者而言,仍未有統(tǒng)一的意見。
3.站在人道的立場,在不影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果之條件下,建議在術(shù)后24~72小時(shí),是狀況給予止痛劑注射。
4.動(dòng)物再疼痛時(shí),其活動(dòng)能力變差,性情改變,發(fā)出聲音,行為和姿勢(shì)怪異,水及食物采食量減少,呼吸速率改變;嚴(yán)重者發(fā)生心衰竭性休克,周邊神經(jīng)反射動(dòng)作用弱而緩慢,四肢及黏膜無血色、蒼白、冰冷無彈性,此時(shí)已威脅其生命,必須立刻處理。
5.給予下列藥物作止痛,消炎之處理
a.抗休克之類固醇
b.麻醉性鎮(zhèn)痛劑
c.非類固醇類抗炎癥藥物
伍、使用劑量
實(shí)驗(yàn)動(dòng)物麻醉劑量因數(shù)據(jù)來源不同差異頗大,本文之劑量僅供參考。嚙齒類實(shí)驗(yàn)動(dòng)物在麻醉時(shí)有幾點(diǎn)要注意:(一)高體表面積比率易在麻醉過程中因散熱而造成體溫降低。(二)靜脈注射麻醉后裔發(fā)生呼吸道疾病,
jHypnorm:成分為fentany/fluanisone,為一種精神性安定鎮(zhèn)痛劑,單獨(dú)使用可有鎮(zhèn)靜止痛作用,可與duazepam/midazolam合用具麻醉作用,可持續(xù)20~40分鐘,每30~40分鐘可繼續(xù)補(bǔ)強(qiáng)注射。過量或欲結(jié)束麻醉可以naloxone(0.1mg/kg IV or IP) 或buprenorphine(0.1~0.2mg/kg IV)緩解。
kDiazepam/midazolam:鎮(zhèn)靜效果佳,但沒有止痛作用,對(duì)于怕痛,易受刺激之天竺鼠而言,此藥是極佳之鎮(zhèn)靜劑。
lKetamine:深度鎮(zhèn)靜,但肌肉松弛度及止痛效果差,最好能與Xylazine合用,動(dòng)物可能仍有痛覺反應(yīng)。
mAcepromazine:中度鎮(zhèn)靜,止痛效果差。
nXylazine:鎮(zhèn)靜,止痛效果差。與Ketamine合用,能持續(xù)30~40分鐘麻醉,但深度淺。
oAlphaxalone/alphadolone: 類固醇麻醉劑,深度鎮(zhèn)靜,個(gè)體差異極大,一般使用于大鼠、天竺鼠,但可能需要2~3ml/平均每一只成年天竺鼠。當(dāng)用于腹腔注射時(shí),麻醉效果不穩(wěn)定,所以盡可能使用靜脈注射,此藥另一優(yōu)點(diǎn)為追加藥量時(shí),不會(huì)延長恢復(fù)期時(shí)間。
pAtropine:抗乙酰膽堿藥物,抑制唾液,支氣管分泌物,保護(hù)心臟不受迷走神經(jīng)抑制,尤其是天竺鼠呼吸道狹窄,易發(fā)生麻醉性窒息。囓齒動(dòng)物易發(fā)生之麻醉藥物性呼吸衰竭可預(yù)使用此藥物予以預(yù)防。
qPentobarbitone:一般建議盡量避免用于囓齒類,因易導(dǎo)致過量,呼吸衰竭,高死亡率,所以若一定要使用,可考慮低劑量注射并合并氣體麻醉,例如methoxyflurane,因其安全范圍大,Halothane亦可使用,但要注意易發(fā)生體溫降低,ether刺激性太大,一般不適合。
在不同動(dòng)物中,天竺鼠是較難達(dá)安全又無麻醉后遺癥的動(dòng)物之一,因此麻醉藥品之選用,術(shù)后照顧非常重要。麻醉技術(shù)日新月異,如有機(jī)會(huì),將再介紹其它訊息,供諸位參考。