導(dǎo)語

流式細(xì)胞儀（Flow Cytometer）是一種在功能水平上對單細(xì)胞或其他生物粒子進(jìn)行定量分析和分選的檢測手段，可以每秒鐘分析上萬個(gè)細(xì)胞，并能同時(shí)從一個(gè)細(xì)胞中測得多個(gè)參數(shù)。其應(yīng)用范圍非常廣泛，而且還在不斷增加。當(dāng)然，細(xì)胞分選也是它的重要應(yīng)用之一。它能夠根據(jù)每個(gè)細(xì)胞的光散射和熒光特征，將特定的細(xì)胞從細(xì)胞群體中分選出來。每次一個(gè)細(xì)胞。所以人們又常常將流式細(xì)胞儀稱為熒光激活細(xì)胞分選儀（fluorescence-activated cell sorter, FACS），其實(shí)FACS并不是流式細(xì)胞儀的通稱，它是BD公司的注冊商標(biāo)。

細(xì)胞分選的原理

當(dāng)經(jīng)熒光染色或標(biāo)記的單細(xì)胞懸液放入樣品管中，被高壓壓入流動(dòng)室內(nèi)。流動(dòng)室內(nèi)充滿鞘液，在鞘液的包裹和推動(dòng)下，細(xì)胞被排成單列，以一定速度從流動(dòng)室噴口噴出。在流動(dòng)室的噴口上配有一個(gè)超高頻的壓電晶體，充電后振動(dòng)，使噴出的液流斷裂為均勻的液滴，待測細(xì)胞就分散在這些液滴之中。將這些液滴充以正、負(fù)不同的電荷，當(dāng)液滴流經(jīng)過帶有幾千伏的偏轉(zhuǎn)板時(shí)，在高壓電場的作用下偏轉(zhuǎn)，落入各自的收集容器中，沒有充電的液滴落入中間的廢液容器，從而實(shí)現(xiàn)細(xì)胞的分離。

流式細(xì)胞分選的特點(diǎn)

1. 少量細(xì)胞分選時(shí)，流式細(xì)胞分選精確度高（99%以上），速度快。目前，先進(jìn)的流式細(xì)胞儀的分選速度可達(dá)25 000個(gè)細(xì)胞/秒以上，比傳統(tǒng)的分選速度提高了很多倍，原來需要一天的工作現(xiàn)在只需要幾小時(shí)就能完成。不過流式細(xì)胞儀分離細(xì)胞的量還是有一定的限制，一次分離的最大合理量約為108個(gè)細(xì)胞。如果細(xì)胞量超過109個(gè)，則需要耗費(fèi)10小時(shí)以上，分選后細(xì)胞的活力會(huì)受到很大的影響。

2. 可以同時(shí)進(jìn)行多個(gè)Marker分選，正選負(fù)選同時(shí)進(jìn)行。以前的流式細(xì)胞儀只能給液滴充上正電荷或負(fù)電荷，因此在電場中只能向左或向右偏轉(zhuǎn)，即兩路分選?，F(xiàn)在的儀器可以給液滴充以不同的電量，從而調(diào)整液滴的偏轉(zhuǎn)角度，實(shí)現(xiàn)多路分選。BD的FACSAria流式細(xì)胞儀就可以進(jìn)行四路分選。

3. 不僅僅限于表面抗原，流式細(xì)胞儀可以根據(jù)任何能檢測到的發(fā)光度（如細(xì)胞體積）或熒光（如DNA、RNA或蛋白含量，酶活性，特異抗原）散射度差異來分離細(xì)胞。如果能保證流式細(xì)胞儀的無菌狀態(tài)，那么分選后的細(xì)胞還可以進(jìn)行培養(yǎng)或其他分析。

4. 如果只是偶爾做幾次細(xì)胞分選的話，用流式分選還是比較劃算的，只需要準(zhǔn)備樣品和抗體，交納一定的儀器使用費(fèi)即可，不需要購買配套的設(shè)備。