在臨床生物化學檢驗工作中,項目校準是經(jīng)常要做的工作之一,如改變試劑的種類或者批號。儀器或者檢測系統(tǒng)進行過一次大的預防性維護或者更換了重要部件,有可能影響檢測性能等,必須對項目進行校準。除此之外,校準一段時間后測定質(zhì)量控制及患者標本時會出現(xiàn)異常的趨勢或偏移,采取一般性糾正措施后,仍不能識別和糾正問題時,就必須重新進行項目校準,這段時間即為校準時限周期。由于每個項目的工作原理、試劑來源以及使用儀器的差異,每個項目的校準時限周期也就不一致。為了解生物化學常規(guī)項目校準時限對檢測結(jié)果的影響,筆者進行了這方面的研究探討,將結(jié)果報道如下。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 儀器:美國貝克曼公司生產(chǎn)的LX20 全自動生物化學分析儀。

1.1.2 試劑:鉀( K) ISE 法、鈉(Na) ISE 法、氯(Cl) ISE 法、鈣(Ca) ISE 法、磷( P) 鉬酸紫外法、二氧化碳(CO2 ) ISE 法、尿素氮(BUN) 脲酶電極法、肌酐(Cr) 堿性苦味酸法、葡萄糖( GLU) 氧化酶電極法、總蛋白( TP) 雙縮脲法、清蛋白(Alb) 溴甲酚紫法、鎂(Mg) Calmagite 比色法,試劑及校準品由貝克曼公司提供;總膽紅素( TB) 礬酸鹽氧化法、直接膽紅素(DB) 礬酸鹽氧化法、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AL T) 速率法、天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST) 速率法、堿性磷酸酶(AL P) 速率法、γ-谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶(γ-GT) 速率法、淀粉酶(AMY) 法、膽固醇(CHO) 氧化酶法、三酰甘油( TG) CPO-PAP 法、肌酸激酶(CK) 速率法、乳酸脫氫酶(LDH) 速率法、尿酸酶(UA) 比色法,均使用上海東方順宇公司的試劑及校準品。質(zhì)控為RANDOX 公司生產(chǎn)的復合非定植臨床化學控制血清,批號:502UN ,371UE。

1.2 方法:本室所做的常規(guī)生物化學檢測項目定標校準后,12 h 為1 周期檢測1 次質(zhì)量控制血清結(jié)果,重復測定4 次,取平均值, 以第1 次測定均值為靶值, 以相對偏倚小于1/ 3CL IA′88 的允許誤差為標準建立質(zhì)量控制系統(tǒng)進行質(zhì)量監(jiān)控,若連續(xù)出現(xiàn)超出范圍的偏倚可判定為超出校準時限,連續(xù)監(jiān)測1 個月,觀察項目定標校準后所檢測質(zhì)量控制血清檢測值的變化情況。

2 結(jié)果

24 個項目在LX20 全自動生物化學分析儀檢測結(jié)果為:校準時限在12 h 的有K、Na 、Cl ; 24 h 的有Ca ; 3 d 的有CO2 、GLU 、BUN、Cr 、P ;1 周的有TP、Alb ;2 周的有Mg、AMY;1 個月的有TB、DB、ALT、AST、ALP、γ-GT、CHO、TG、CK、LDH、UA ,見表1 。

校準是一個測試和調(diào)整儀器、試劑盒或者檢測系統(tǒng)以提供反應(yīng)和所測物質(zhì)之間的已知關(guān)系的過程。實驗室在進行校準工作時,最重要的是建立合適的校準方法,包括選擇合適的校準品,校準品的數(shù)目、類型和濃度,校準品應(yīng)盡可能溯源至參考方法和(或) 參考物質(zhì),以及確立校準的頻度。校準的頻度是根據(jù)不同項目的校準時限周期而定的,不是僅進行1 次就可萬事無憂、一勞永逸;也不是無原則性地、隨隨便便地校準。選擇最佳校準時間,既能節(jié)省檢驗工作的時間和成本,又能保證結(jié)果的準確性,為臨床提供可靠的數(shù)據(jù)。筆者通過對24 項臨床常規(guī)生物化學檢驗項目在一次性定標校準后允許誤差范圍時限的研究表明,不同項目之間因方法學、試劑來源及實驗條件之間的差異造成校準時限顯著不同。K、Na 、Cl 在12 h 后即偏離靶值超出允許范圍,Ca 也僅僅延長了1 倍的時限。作為電解質(zhì)的項目原本要求就較高,再加上電極本身易波動,這就要求這些項目最好是12 h 定標1 次。同樣是電極法測定的CO2 項目,因允許偏倚范圍較大,達( ±10 %) ,因而它可以3 d 校準1次。GLU 、BUN、Cr 、P 等項目在LX20 全自動生物化學分析儀上均是采用的杯化學法,其反應(yīng)快,但穩(wěn)定性不如常規(guī)比色法及速率法,校準時限不能超過3 d。TP、Alb 同樣是采用的杯化學法,但二者穩(wěn)定性較好, 校準時限可以延至1 周以上。Mg、TB、DB、ALT、AST、ALP、γ-GT、AMY、CHO、TG、CK、LDH、UA 等生物化學項目采用的均是常規(guī)比色法或速率法,因LX20 儀器本身穩(wěn)定性是很好的,其校準時限主要與試劑有關(guān),除了Mg 和AMY兩種試劑可能存在穩(wěn)定性的問題應(yīng)2 周校準1 次,其余的生物化學項目定標1 次可以保持結(jié)果的準確性在1 個月以上,實際工作中筆者發(fā)現(xiàn)這些項目在同一批內(nèi)的試劑如無特殊情況基本上僅校準1 次就足夠了。

本文是以相對偏倚小于1/ 3 CLIA′88 的允許誤差為推薦值,而不是以t 檢驗為判定標準。筆者通過監(jiān)測質(zhì)量控制血清結(jié)果發(fā)現(xiàn),24 個生物化學常規(guī)項目中,在一段時間內(nèi)有些經(jīng)t檢驗有統(tǒng)計學意義的項目,實際上檢測結(jié)果并未超出允許誤差范圍,如CO2 、ALP、γ-GT 等,通常此類項目的允許誤差范圍較寬;而有些要求較嚴的項目,如Na 、Cl 等經(jīng)t 檢驗未有統(tǒng)計學意義,實際上檢測結(jié)果已經(jīng)超出了允許誤差范圍。所以實際工作中應(yīng)以特定的值為參考,當然本文在此推薦的值并不代表合理或理想的測定允許誤差范圍,僅此作為借鑒。重要的是,每個實驗室應(yīng)根據(jù)自己的特點科學地定時進行項目校準,建立起合理化的室內(nèi)質(zhì)量控制系統(tǒng),保證全自動生物化學分析儀檢測所有項目結(jié)果準確可靠。